Bakterial infektsiyalarning xilma-xilligi patogenni aniq aniqlash va uning turlarini aniqlashni talab qiladi. Mikroorganizmning turini aniqlash uchun mikrobiologlarga uning tinktorial xususiyatlari - mikrobning turli bo'yoqlar bilan bo'yashga moyilligi yordam beradi. Bu usul patogenning morfologiyasini o'rganish imkonini beradi. Bakteriyalarning tinktorial xossalari mikrobiologiya sohasidagi amaliy va nazariy tadqiqotlar uchun katta ahamiyatga ega.
Mikrobial tadqiqot
Bakteriologiyada mikroorganizmlarni bo'yashning ko'plab usullari mavjud. Ularning barchasi bakteriyalarning tinktorial xususiyatlariga asoslangan. Bo'yash ularning shakli, tuzilishi, o'lchami, nisbiy holatini aniqlash imkonini beradi. Bu umumiy biologiya va qiyosiy mikrobiologiyaning mikroorganizmlar turlarini tizimlashtirish muammolarini hal qilish imkonini beradi.
Nega ularni bo'yash
Bakteriyalar amaldashaffof organizmlar va binoni ishlatmasdan, ular an'anaviy mikroskopiya uchun yomon ko'rinadi. Ob'ektlarni o'rganish uchun mikroskopning maxsus turlaridan (fazali kontrast, qorong'u maydon) foydalanishingiz mumkin, ammo eng oson yo'li bo'yashdir, shundan so'ng bakteriyalar an'anaviy yorug'lik mikroskopida ko'rinadigan bo'ladi.
Namunani tayyorlash
Qanday bo'yash texnikasidan qat'i nazar, o'rganilayotgan ob'ektni tayyorlashning yagona qoidalari mavjud. Quyidagi bosqichlar majburiydir:
- Steril asboblar shisha slaydda surtma hosil qiladi.
- Namuna quritilmoqda. Bu xona haroratida yoki quritish shkaflari yordamida amalga oshiriladi.
- Fiksatsiya bosqichidan keyin - mikroorganizmlar stakanga maxsus birikmalar bilan biriktiriladi.
- To'g'ri bo'yash - namuna belgilangan vaqt davomida bo'yoq bilan qoplanadi, shundan so'ng u yuviladi.
- Yakuniy quritish - namuna yana quritiladi.
Eng keng tarqalgan bo'yoqlar
Eng ko'p ishlatiladigan bo'yoqlar turli kislota qiymatlari (pH) bo'lgan anilinga asoslangan. Ko'pgina bo'yoqlar spirtda suyultirilgan kukunlardir.
Kationlari rang beruvchi moddalar bo'lgan bo'yoqlar asosiy deb ataladi (pH 7 dan yuqori). Ular mikroorganizmlarni qizil (magenta, safranin), binafsha (metil binafsha, tionin), ko'k (metilen ko'k), yashil (malakit yashil), jigarrang (xrizoidin) va qora (indulin) ranglarda bo'yash uchun ishlatilishi mumkin.
Bo`yoq moddalari anionlar bo`lgan bo`yoqlar kislotali (pH 7 dan kam) deyiladi. Ular namunani qizil (eozin), sariq (pikrin) yoki qora (nigrozin) rangga bo'yashadi.
Neytral boʻyoqlar guruhi (masalan, rodamin B) mavjud boʻlib, ularda ham kationlar, ham anionlar rang beruvchi vosita sifatida ishlaydi.
Madaniyat oʻlik yoki tirik
Bo'yash usullari sinov namunasining hayot shakliga ko'ra ikki guruhga bo'linadi.
- Hayotiy (umr bo'yi) bo'yash. Mikroorganizmlarning xossalarini o'rganishning bu usuli tirik to'qimalarni o'rganishda qo'llaniladi, bu mikroblarning hayotiy jarayonlarini kuzatish imkonini beradi. Bu binoni uchun past toksiklik va yuqori penetratsion kuchga ega bo'yoqlardan foydalaniladi.
- Postvital bo'yash. Bu o'lik yoki o'ldirilgan mikroorganizmlarning bo'yalishi. Bakteriyalarning tinktorial xususiyatlari tufayli mikrobiologlar ularning tuzilishini aniqlaydilar. Aynan shu binoni eng ko'p qo'llaniladi.
Gram-musbat va gramm-manfiy
Bakteriyalarning mana shu xossalarini turli dori vositalari uchun koʻrsatmalarda topish mumkin. Bakteriyalarning tinktorial xususiyatlarini o'rganishning bu usuli gentian binafsha bo'yoq va yod fiksatsiyasidan foydalanishga asoslangan. Bu 1884 yilda uni taklif qilgan daniyalik shifokor Xans Kristian Gramning texnikasi. Bunday bo'yash natijasida bakteriyalar ikki guruhga bo'linadi:
- Gram (+) - ko'k rangga aylanadi(stafilokokklar va streptokokklar).
- Gram (-) - pushtidan qizilgacha bo'yoq (enterobakteriyalar, salmonellalar, E. coli).
Turli xil bo'yash natijalari bakterial devorlarining turli xil tinktorial xususiyatlariga bog'liq. Gram bo'yoq usuli hamon ba'zi yuqumli kasalliklar diagnostikasida asosiy hisoblanadi.
Boshqa rang berish texnikasi
Bakteriologiyada keng qoʻllaniladigan yana bir necha usullarni tavsiflaymiz.
- Zihl-Nelson usuli - bakteriyalarning kislotaga chidamliligini aniqlaydi. U sil va mikobakterioz qo'zg'atuvchilarini aniqlaydi.
- Romanovskiy-Giemsa texnikasi - atsidofil (sirka kislotasi va sut kislotasi) bakteriyalarini qizil va bazofil (spiroxetalar va protozoa) ko'k rangga bo'yadi.
- Morozov texnikasi - bakteriyalarni jigarrang bo'yadi va ularning flagellalarini ko'rinadigan qiladi.
Sporlarni koʻrish mumkin
Tsielning fuchsin bilan bo'yalishi bakteriya sporalarini ko'rish imkonini beradi. Bo'yashdan keyin pushti rangga ega bo'lib, ular ko'k bakteriyalar fonida aniq ko'rinadi. Bu usul ham bakteriologiyaning asbobidir va katta amaliy ahamiyatga ega.
