Mikrobiologiyada radioimmun tahlili: qoʻllanilishi, mexanizmi

Mundarija:

Mikrobiologiyada radioimmun tahlili: qoʻllanilishi, mexanizmi
Mikrobiologiyada radioimmun tahlili: qoʻllanilishi, mexanizmi
Anonim

Zamonaviy tibbiyotda patogenning ta'rifi, immun reaktsiyasini rag'batlantiradigan genetik jihatdan begona moddalar, nuklein kislotalar, shuningdek, allergik va immun o'zgarishlar asosida odamlarda kasalliklarning etiologiyasini aniqlashga imkon beradigan o'ziga xos diagnostika usullari mavjud. uning harakatlari tufayli sodir bo'ladi. Bugungi kunda RIA immunologiya va virusologiyada keng qo'llaniladi, ya'ni radioimmunoassay, o'rnatish maqsadlari, tarkibiy qismlari, kursi, hisobga olinishi, biz ushbu maqolada ko'rib chiqamiz. Ushbu tahlil antijenlarni ularning antikorlar bilan o'zaro ta'siri natijasida aniqlashga qodir.

radioimmunoassay
radioimmunoassay

Tanrif

RIA - suyuqlikdagi biologik faol moddalarni diagnostika qilish usuli bo'lib, u maxsus bog'lash tizimlariga ega bo'lgan radionuklidlar bilan etiketlangan o'xshash moddalardan foydalanganda antijenlarning antikorlar bilan reaktsiyasiga asoslangan. Ularning o'zaro ta'siridan keyinimmun kompleks hosil bo'lib, ajralib chiqadi va uning radioaktivligi o'rganiladi. Ma'lumki, radioimmunoassay standart reagentlar to'plamlari yordamida amalga oshiriladi.

Har bir reaktiv bitta aniq moddaning konsentratsiyasini aniqlashga qodir. Odamdan olingan biologik suyuqlik reagent bilan aralashtiriladi, inkubatsiya davridan keyin erkin va bog'langan radioaktiv moddalar ajratiladi, so'ngra radiometriya o'tkaziladi va natijalar hisoblanadi. Yod izotopi moddalarni belgilash uchun ishlatiladi. Belgilangan va ma'lum miqdorda qo'shilgan.

radioimmunoassay mikrobiologiyasi
radioimmunoassay mikrobiologiyasi

Ilova

Radioimmun tahlili tibbiyot va mikrobiologiyada keng qoʻllaniladi. U yurak va qon tomir kasalliklarini, endokrin va boshqa tana tizimlarining kasalliklarini tashxislash uchun ishlatiladi. RIA ham ko'pincha bepushtlikning sababini, homila rivojlanishining patologiyasini aniqlash uchun ishlatiladi. Onkologiyada ushbu tahlil davolash samaradorligini kuzatish imkoniyatiga ega bo'lish uchun neoplazmalarning belgilarini aniqlash uchun amalga oshiriladi. Immunologiyada RIA qonda immunoglobulinlar, fermentlar, oqsillar va boshqalar mavjudligini o'rganish uchun ishlatiladi. Bugungi kunda ushbu tahlil turli xil gormonlar kontsentratsiyasini bir grammning milliondan bir qismigacha aniqlash imkonini beradi. Shunday qilib, radioimmun qon tahlili kardiologiya, onkologiya, endokrinologiya, ginekologiya va virusologiyada keng qo'llaniladi.

radioimmunoassay ilovasi
radioimmunoassay ilovasi

RIA usullari

Tabiatiga qarab bir necha tahlil usullarini ajratish odatiy holdir.reaktsiyalar:

  1. Raqobatdosh bo'lmagan usul standart va aniqlanadigan antijenler, bufer eritmasi, izotop bilan belgilangan antikorlar, sorbent bilan bog'lanadigan ma'lum antikorlar kabi reaktsiya komponentlari bilan tavsiflanadi. Tekshiriladigan antikorlarga antigen qo'shiladi. Inkubatsiyadan so'ng antigen-antikor komplekslari paydo bo'ladi, sorbent yuviladi, etiketli antikorlar qo'shiladi, ular kompleksdagi antigen bilan bog'lanadi. Radioaktivlik tekshirilayotgan antigen kontsentratsiyasiga bog'liq.
  2. Raqobatbardosh radioimmunoassay antigen raqobati bilan boshqariladi. Bu erda reaksiyaning nazorat qiluvchi va aniqlangan antijenler, bufer eritmasi, sorbent bilan bog'laydigan ma'lum antikorlar, shuningdek, izotop bilan belgilangan antigen kabi komponentlari mavjud. Tashxis tekshirilayotgan antigenni kiritish bilan boshlanadi. Sorbentda antigen-antikor kompleksi hosil bo'ladi. Keyin sorbent yuviladi va etiketli antijen AOK qilinadi. Bunda u antikor bilan bog'lanadi. Hisoblagichlar yordamida reaksiya va radioaktivlik miqdori o'lchanadi. U namunadagi antigen miqdoriga teskari proportsional bo'ladi.
  3. Bilvosita usul eng keng tarqalgan. Bunday holda, reaktsiya komponentining radioimmunoassay nazorati va sinov zardobi, sorbentga bog'langan antijenler yoki antikorlar, izotoplar bilan belgilangan antikorlar, bufer eritmalari kabi mavjud. Tashxis qo'yilgan antikorlar yoki antijenler sorbent bilan bog'langan antijenler yoki antikorlar bilan reaksiyaga kirishadi. Keyin inkubatsiya chiqariladi, etiketli antikorlar AOK qilinadi, ular bog'lanadiantigen-antikor komplekslari.

Tahlil metodologiyasi

Demak, radioimmunoassay maxsus reagentlar yordamida amalga oshiriladi. To'plamlar standartdir, shuning uchun har qanday xato yoki buzilishlarga yo'l qo'yilmaydi. Diagnostika natijalari ishonchli. Tahlil ertalab amalga oshiriladi, buning uchun ular odamdan venoz qonni olishadi. Laboratoriyada sarum qondan ajratiladi, u RIA uchun ishlatiladi. Bu sarum reagentlar bilan aralashtiriladi. Olingan aralash ma'lum bir haroratda termostatda inkubatsiya qilinadi.

Olingan aralashmada erkin va bog’langan izotoplar ajratiladi. Shundan so'ng, olingan material tekshiriladi va natijalar hisoblanadi. Radioimmunoassay mexanizmi bir nechta variantga ega. Yuqorida tavsiflangan texnika suyuq fazali RIA hisoblanadi, chunki barcha komponentlar suyuq holatda. RIA va qattiq faza mavjud, bu erda antikorlar suyuqlikda erimaydigan tashuvchiga joylashtiriladi.

radioimmun qon testi
radioimmun qon testi

Diagnostika mavjudligi

Tibbiyotda ushbu diagnostika usulidan foydalanish har yili tobora ommalashib bormoqda. So'nggi paytlarda radioimmunoassay standart diagnostika usuliga aylandi, u yakuniy tashxis qo'yishda shifokor tomonidan belgilanishi mumkin. Uzoq vaqt davomida bu turdagi tahlil faqat laboratoriyalarda amalga oshirildi, bugungi kunda u keng tarqalgan tadqiqot usuliga aylandi. Ammo RIA qimmat uskunalardan (gamma hisoblagichlardan) foydalanishni talab qiladi va reagent to'plamlari qisqa xizmat muddatiga ega. Bularning barchasi bunday tahlilning asosiy kamchiliklari bo'lib, uni aniqlaydiqimmat.

Bundan tashqari, RIA yaqinda izotoplar bilan o'zaro ta'sir qilishni talab qilmaydigan zamonaviyroq tadqiqot usullarini siqib chiqara boshladi. Bularga ferment immunoassay kiradi. Shunday qilib, RIA ko'plab klinikalarda maqsadga muvofiqdir. U uzoq vaqtdan beri yirik shaharlar va diagnostika markazlarida qo'llanilgan, ammo kichik shaharlardagi oddiy kasalxonalarda bu tahlil qimmat bo'lgani uchun amalda qo'llanilmaydi.

radioimmunoassay komponentlari
radioimmunoassay komponentlari

RIA qadr-qimmati

Radioimmunoassay juda koʻp afzalliklarga ega. Bu juda o'ziga xos va yuqori sezuvchanlikka ega, bu juda oz miqdorda biologik faol moddalar mavjudligini aniqlash imkonini beradi. Ushbu tahlil juda sodda tarzda amalga oshiriladi, odam faqat venoz qonni topshirishi kerak. Sinov natijalari 100% aniq va ertasi kuni tayyor. RIA ham osonlik bilan avtomatlashtirilishi mumkin. Shunday qilib, ushbu tahlil yuqumli bakteriyalarning chiqindi mahsuloti bo'lgan oqsillarni aniqlash imkonini beradi, bu organizmda infektsiya mavjudligini ko'rsatadi.

komponentlar taraqqiyot hisobini belgilash maqsadi radioimmun tahlil
komponentlar taraqqiyot hisobini belgilash maqsadi radioimmun tahlil

Virusologiyada diagnostika

Eng istiqbolli RIA virusologiya uchun, chunki u virusli patogenlarni tezda aniqlash imkonini beradi. Sababi, keyingi yillarda tez sur’atlar bilan tarqalib, odamlar o‘limiga sabab bo‘layotgan turli infektsiyalar ko‘payib bormoqda. Bu, ayniqsa, yuqori bo'lmagan mamlakatlar uchun to'g'ri keladiijtimoiy va iqtisodiy rivojlanish (Uzoq Sharq mamlakatlari), radioimmunoassay bu erda shunchaki ajralmas hisoblanadi. Mikrobiologiya ham patogen bakteriyalar keltirib chiqaradigan yuqumli kasalliklarni aniqlash uchun ushbu diagnostika usulidan foydalanadi. Misol uchun, RIA tif isitmasi aniqlash uchun keng qo'llaniladi. Kasallikning dastlabki kunlarida, davolanishni tayinlashdan oldin, najas va qusishni o'rganish kerak. Biroq, diagnostika natijalari uzoq vaqtdan keyin olinadi. Bu erda RIA yordamga keladi, tahlil qisqa vaqt ichida kasallikning qo'zg'atuvchisini aniqlash imkonini beradi. Biror kishi qon beradi, ertasi kuni tadqiqot natijalari tayyor. Ushbu tahlil aniq tashxis qo'yishga yordam beradi.

Natijalar

Radioimmunoassay hozirda eng sezgir diagnostika usullaridan biri hisoblanadi. U antikorlarni olish mumkin bo'lgan har qanday moddani tahlil qilish uchun ishlatiladi. Ushbu usul tekshirilayotgan suyuqlikning eng kichik hajmida ko'plab namunalar olish, shuningdek, natijalarni eng qisqa vaqt ichida yozib olish imkonini beradi, chunki uni to'liq avtomatlashtirish mumkin. Ushbu tahlil 1950-yillarda Solomon Burson tomonidan ishlab chiqilgan. 30 yil o'tgach, u keng tarqaldi. Bugungi kunga qadar RIA ga yuz foiz alternativa yo'q, chunki tahlil yuqori sezuvchanlikka ega. RIA tibbiyotning turli sohalarida, shuningdek, mikrobiologiya va virusologiyada qo'llaniladi.

radioimmunoassay mexanizmi
radioimmunoassay mexanizmi

Nihoyat

Usulni virusologiyada qo'llash bugungi kunda juda dolzarbdir, chunki u beradiinfektsiyalarning tarqalishini tekshirish, to'g'ri tashxis qo'yish va maxsus davolashni buyurish qobiliyati. Bu muammo, ayniqsa, iqtisodiy va ijtimoiy rivojlanish darajasi past bo'lgan mamlakatlar uchun dolzarbdir. Shuningdek, ushbu tahlil inson organizmidagi gormonlar va fermentlar miqdorini aniqlash imkonini beradi. Ishonchli natijalarga erishish uchun tadqiqotchi faqat tahlil qilish uchun qon topshirishi kerak. Tibbiyot bir joyda turmaydi, radioimmunoassay bilan bir qatorda yangi tadqiqot usullari paydo bo'ladi, ammo RIA tibbiy diagnostika bo'yicha yetakchilardan biri bo'lib qolmoqda.

Tavsiya: